%0 Journal Article
%T 美洲商陆抗病毒蛋白-ⅱ基因的克隆和表达
%A 黄建松 詹金彪* 邹媛 冯微宏
%J 生物工程学报
%D 2006
%X 根据报道的cdna序列，用rt-pcr的方法从美洲商陆夏季的叶片中克隆美洲商陆抗病毒蛋白-ⅱ（pokeweedantiviralproteinⅱ，pap-ⅱ）基因。将pap-ⅱ基因克隆至表达载体pet-28a(+)并在大肠杆菌中表达，sds-page电泳分析结果表明，pap-ⅱ蛋白在bl21(de3)菌中获得表达，表达产物以不溶性包涵体形式存在，经过溶解包涵体、复性和bbstnta树脂柱亲和层析纯化，获得高纯度的pap-ⅱ蛋白。用非放射性基于elisa方法检测经过复性纯化后pap-ⅱ蛋白和蓖麻毒素a链（rta）在体外对hiv-1整合酶有较强的抑制活性，其ic50分别约为303μg/ml，220μg/ml。用mtt法分析pap-ⅱ蛋白的生物学活性，复性纯化后蛋白对hep-g2和hela细胞有细胞毒作用，ic50分别为93μg/ml，102μg/ml，说明了pap-ⅱ蛋白能抑制肿瘤细胞的生长。构建的pap-ⅱ表达系统所表达的蛋白经复性后具有生物学活性，为进一步研究pap-ⅱ的抗hiv-1机制和抗肿瘤作用奠定了基础。
%K 核糖体失活蛋白
%K 美洲商陆抗病毒蛋白-ⅱ
%K hiv
%K 1整合酶
%K 表达
%K 细胞毒性
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=06040592&flag=1