%0 Journal Article %T 串联表达prrsvm与gp5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究 %A 蒋文明 姜平* 李玉峰 汤景元 王先炜 杜以军 %J 生物工程学报 %D 2006 %X 利用pcr扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的m基因,按正确的读码框与gp5基因串联,成功构建穿梭载体pshuttle-cmv-m-gp5,经pcr、测序鉴定正确。pmeⅰ线性化后在bj5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体padeasy-1同源重组,产生重组腺病毒dna。重组腺病毒dna经pacⅰ线性化后用脂质体转染hek-293a细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过ifa可以检测到m与gp5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白。将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应答(elisa抗体和中和抗体)和细胞免疫应答(淋巴细胞增殖和ctl反应)。证明该重组腺病毒具有较好的免疫原性,为下一步猪体免疫试验奠定了基础。 %K prrsv %K m %K gp5 %K 重组腺病毒 %K 体液免疫 %K 细胞免疫 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=06040555&flag=1