%0 Journal Article %T 人蛋白质二硫键异构酶cdna基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 %A 高音 杨志伟** 华振玲 高虹万平 黎红晔 %J 生物工程学报 %D 1999 %X 从人胚胎肝组织中分离纯化出总rna,在总rna中提取mrna,经逆转录得到cdna第一条链,并以之为模板和相应寡聚脱氧核苷酸为引物.进行pcr合成人蛋白质二硫键异构酶(proteimdisulfideisomerase,pdi)cdna基因,将所得cdna克隆到质粒pucl8上,转化大肠杆菌dh5a细胞,进行诱导表达筛选和活性筛选。将筛选的基因克隆到载体pbv220上,在大肠杆菌细胞中表达,产物以溶解形式在胞浆中表达。表达产物经硫酸铵分级沉淀和deaesepharosefastflow柱层析分离,产物的纯度与活性分别为90%、1100u/g。 %K 蛋白质二硫键异构酶 %K 基因克隆和表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=99030349&flag=1