%0 Journal Article %T 三角酵母d-氨基酸氧化酶基因的克隆、测序及表达* %A 刘洪波 姜卫红** 杨蕴刘** 赵国屏 焦瑞身 %J 生物工程学报 %D 1999 %X 利用跨越内含子的pcr技术,三角酵母(trigonopsosvariabilis)变种fa1-10中扩增得到d-氨基酸氧化酶基因(daao),并通过ta克隆的方法将其克隆至pgem—t载体。序列测定结果表明,所得daao基因的5’端内含子已被删除,基因总长度为1071bp,它与trigonopsisvariabilisd-氨基酸氧化酶同源性达98.3%,与fusariumsolanii和rhodotoru-lagracilis的同源性分别是38.9%和30.8%。为提高表达水平,又将此基因转移至高表达载体pet-28b上.在大肠杆菌bl-2l(de3)中进行诱导表达。经iptg诱导,目的蛋白的产生量可占菌体总蛋白量的46%,分子量约为38kd。d-氨基酸氧化酶的活力可达802u/l。 %K 三角酵母 %K d-氨基酸氧化酶 %K pcr %K 高表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=99030337&flag=1