%0 Journal Article %T 江浙蝮蛇神经生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化* %A 郭丽英 钟晓燕 吴详甫 周元聪** %J 生物工程学报 %D 1999 %X 将江浙蝮蛇(agkistrodonhalyspallas,a.h.p)神经生长因子(nervegrowthfactor,ngf)基因克隆于分泌型原核表选载体pet-22b+,以c端融合了6个组氨酸的形式在大肠杆菌b12l(de3)中进行了iptg诱导表达。sdspage分析确定有一比理论值略大的诱导表达条带,其表达量占全菌蛋白质的20%左右,且表达蛋白质主要是以包涵体的形式存在。用6mol/l的盐酸胍溶解包涵体后,利用固定化金属离子(ni2+)配体亲和层析一步纯化目的蛋白质,纯度可达80%左右。对该重组肽进行变复性研究。利用pcl2细胞进行生物活力测定,证明表达产物具有ngf生物活力。 %K 江浙蝮蛇 %K 神经生长因子 %K his6融合表达 %K pc12细胞 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=99030293&flag=1