%0 Journal Article %T 抗cd5单链抗体基因克隆和表达 %A 王菲 马清钧* %J 生物工程学报 %D 2001 %X 以分泌抗cd5单克隆抗体的杂交瘤细胞poly(a)mrna为模板,通过rtpcr扩增出抗cd5单克隆抗体的重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)cdna片段组装出抗cd5单链抗体(scfv)cdna片段。该scfv片段被克隆到pcantab5e载体上,以e.colitg1为宿主,进行噬菌体表面呈现。通过molt4细胞表面分子cd抗原,对噬菌体表面呈现的scfv进行免疫亲和富集筛选。经细胞elisa鉴定,得到4株高亲和力克隆。dna序列分析得知,单链抗体全长732碱基,其中vh为339碱基,vl为300碱基。抗cd5scfv在e.colihb2151中以可溶形式分泌表达,产物主要分布于周质之中,占周质中总蛋白的20%。 %K 单链抗体 %K cd5抗原 %K 克隆 %K 表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=01020131&flag=1