%0 Journal Article %T 植酸酶phya基因在解脂耶氏酵母po1h中的表达 %A 陈云? %A 邹由? %A 王一丁? %A 马立新? %J 生物工程学报 %P 610-615 %D 2010 %X 本实验通过pcr方法从毕赤酵母gs115-phya中扩增出不含有信号肽及内含子的黑曲霉nrrl3135植酸酶phya基因,并将其克隆到表达载体pina1297中,得到表达载体pina1297-phya,利用醋酸锂转化法将线性化载体转化到解脂耶氏酵母po1h中,通过ynbcasa和ppb平板筛选出阳性表达菌株,阳性菌株在ym培养基中28℃培养6d后酶活达到最大为636.23u/ml。表达上清经sds-page分析得到表达植酸酶分子量约为130kda,但通过去糖基化处理后其分子量变为51kda,与理论值相符。经过酶学性质分析表明重组植酸酶最适ph为5.5,最适温度为55℃,该酶在ph2.0~8.0处理1h后仍有较高酶活,并且90℃处理10min后还有86.08%的残留酶活,其抵抗胃蛋白酶和胰蛋白酶能力也较强。 %K 黑曲霉 %K 植酸酶 %K phya基因 %K 解脂耶氏酵母po1h %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc10000610&flag=1