%0 Journal Article %T 重叠延伸pcr克隆三孢布拉霉carra基因及其功能活性检测系统的构建 %A 汤晖? %A 石楠? %A 于淼? %A 刘龙? %A 刘静? %A 贾颖? %A 牛宏彦? %A 张利平? %J 生物工程学报 %P 990-997 %D 2011 %X 三孢布拉氏霉菌carra蛋白,既有番茄红素环化酶功能活性又有八氢番茄红素合成酶功能活性,为了对carra蛋白进行双功能活性分析,及探测carra蛋白的番茄红素环化酶功能活性位点,构建了在大肠杆菌体内通过颜色互补检测两种酶活性的系统。通过重叠延伸pcr的方法克隆得到了carra基因,并构建原核表达载体pet28a-carra,与携带crti/crtb/crte基因簇的质粒pac-lyc共转化bl21(de3),验证番茄红素环化酶功能活性;与以pac-lyc为基础构建的携带crti/crte基因簇的质粒pac %K 重叠延伸pcr %K carra基因 %K 番茄红素环化酶 %K 八氢番茄红素合成酶 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11000990&flag=1