%0 Journal Article %T 噬菌体展示hiv-1tat38-61碱性区51和55位随机突变体文库的构建 %A 葛宜兵? %A 杨旭芳? %A 杜哲明? %A 庞强? %A 曹洁? %A 陈秋莉? %A 王锦红? %A 张华群? %A 廖文婷? %A 祁培培? %A 刘超? %A 章萍萍? %A 邓松华? %A 潘卫? %J 生物工程学报 %P 755-763 %D 2011 %X 为了构建噬菌体展示tat38-61(51n/55n)碱性区突变体文库,进一步研究hiv-1tat38-61表位的分子进化筛选,采用含随机核苷酸序列的引物,通过overlappcr的方法获得51和55位氨基酸随机突变的全长tat编码序列,再以此为模板pcr扩增出两端含有xbai识别序列的tat38-61突变体片段hiv-1tat38-61(51n/55n),克隆至噬菌体展示载体pcantab5s上,转化大肠杆菌tg1,经m13k07辅助噬菌体拯救,构建噬菌体展示tat38-61(51n/55n)碱性区突变体文库。结果显示文库的库容量为5.0×106,滴度为2.65×1012tu/ml,阳性克隆率为56.50%;序列分析显示文库中51、55位核苷酸与氨基酸均呈随机性分布,达到了对文库进行分子进化筛选的要求,为获得可用作疫苗候选物的新型tat突变体奠定基础。 %K hiv-1 %K tat %K 碱性区 %K 随机突变 %K 噬菌体展示 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11000755&flag=1