%0 Journal Article %T 一种嗜热耐酸古细菌jp2菌株编码的热稳定dna连接酶的生物化学及酶学特性研究 %A 兰海燕? %A 刘 纯? %A HENDRY PHIL? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2006 %X 对分离自巴布亚新几内亚地热活跃区的一种嗜热耐酸古细菌———jp2菌株中的dna连接酶基因进行了克隆、表达、纯化,并对其生物化学及酶学特性进行了研究.对其核酸及氨基酸序列的分析表明:jp2菌株的dna连接酶与古细菌种sulfolobussolfataricus和sulfolobusshibatae的dna连接酶具有很高的同源性,尤其在与功能紧密相关的6个保守结构基序的一致性更高.jp2连接酶表现出高的dna缺口连接活性,在二价金属辅因子的选择方面,jp2连接酶更倾向于mn2+离子而不是mg2+、ca2+及其他离子.不同温度时的热稳定性测试显示:jp2连接酶在50~80℃时为较适连接温度,当温度不超过85℃时,连接酶的活性在5h内保持相对稳定,但在90℃以上活性则很快降低.还分离纯化了jp2的分子伴侣———tf55,并将其应用于增加jp2连接酶的热稳定性研究.结果表明:在体外85℃时,分子伴侣未增加连接酶的热稳定性,可能的原因是在85℃体外状态下tf55本身就表现出不稳定性. %K dna %K 连接酶 %K sulfolobus %K spp. %K 嗜热耐酸古细菌 %K 耐热性 %K 分子伴侣tf55 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20060284&flag=1