%0 Journal Article %T 小鼠肌肉生长抑制素基因短发夹rna促进myod在c2c12细胞中的表达 %A 娄颜坤? %A 罗娟? %A 代蓉? %A 李宁? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2010 %X 肌肉生长抑制素(myostatin,mstn)属于转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,tgf-β)超家族,主要功能为负向调节骨骼肌的生长.肌肉生长抑制素基因敲除小鼠肌肉出现显著增加,而将干涉该基因的短发夹rna注射并电击转化入大鼠胫前肌则引起肌肉重量、肌纤维以及mhcⅱ表达的增加.通过与小鼠肌肉生长抑制素基因表达载体共转染hek293细胞,筛选到两条能够高效抑制小鼠肌肉生长抑制素基因表达的小干涉rna.构建了这两条小rna的表达载体mst-shrna1和mst-shrna2,用其分别转染小鼠c2c12成肌细胞,并通过g418药物筛选和流式细胞仪富集整合了短发夹rna表达载体的阳性细胞.通过采用real-timepcr和westernblot分析,检测到在分别整合了mst-shrna1和mst-shrna2的c2c12细胞中,内源性肌肉生长抑制素基因的mrna水平分别下降了10.2%和35.5%,蛋白质表达则分别下降了29.3%和64.7%.同时,在这两组中myod的表达上升了24.4%和40.4%,证明通过rna干涉实现的肌肉生长抑制素基因的抑制导致了下游myod基因表达的上调.这些结果表明内源性产生的肌肉生长抑制素基因小干涉rna能够有效抑制该基因的表达.这种以rna干涉技术为基础促进肌肉生长的方法为遗传育种提供了一种新技术,能够在对家畜经济性状的改良中发挥重要作用. %K 肌肉生长抑制素 %K rna干涉 %K 小干涉rna %K 短发夹rna %K myod %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20090486&flag=1