%0 Journal Article
%T hvegf165和嵌合水蛭肽融合基因的构建、表达和活性检测
%A 沈 雳？
%A 陈少萍？
%A 秦永文？
%A 蔡在龙？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2005
%X 根据抗ptca或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点，用基因重组技术构建了hvegf165和嵌合水蛭肽(fusedhirudin，fh)融合基因，并克隆到真核表达载体pcdna3.0中，通过脂质体介导将pcdna3.0/hvegf165-fh转染到人内皮细胞株(ecv304)中，rt-pcr及蛋白质印迹证明融合基因hvegf165-fh在ecv304细胞中得到表达(分子质量为24ku左右).通过体外活性检测———mtt法检测hvegf165-fh对ecv304细胞增殖的影响，通过体外血管生成分析hvegf165-fh对内皮细胞株ecv304增殖的影响.通过体外抗栓活性检测，表明表达产物具有促进内皮细胞株增殖及加快血管生成的作用，同时显著抑制了adp诱导的血小板聚集率(p<0.05)并显著延长aptt和tt(p<0.05).实验结果表明，融合基因在内皮细胞株中得到表达，表达的融合蛋白具有hvegf165和嵌合水蛭肽(fh)的双重活性，这为以后的融合基因治疗再狭窄的动物实验打下了良好基础.
%K 血管内皮生长因子
%K 水蛭肽
%K 融合基因
%K pcdna3.0
%K 载体构建
%K 基因表达
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2005-0390&flag=1