%0 Journal Article %T 二硫键形成促进双载体转断裂b区缺失型凝血因子ⅷ基因 %A 朱甫祥? %A 杨树德? %A 刘泽隆? %A 缪静? %A 屈慧鸽? %A 迟晓艳? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2012 %X 双载体共转b区缺失型凝血因子ⅷ(bdd-fⅷ)重链和轻链基因是克服腺相关病毒载体(aav)容量限制的一种策略,但重链分泌的低效性产生链不均衡性,影响转基因的功效.假设重、轻链链间二硫键形成可提高双载体转bdd-fⅷ基因的功效,本文将bdd-fⅷ的重链a2区的met662和轻链a3区的asp1828突变为cys.双载体培养的cos-7细胞共转染突变重链和轻链基因,westernblot显示细胞内二硫键交联的重、轻链蛋白形成,elisa和coatest分析细胞培养上清的bdd-fⅷ重链分泌量和生物活性,分别为(109±13)μg/l和(0.65±0.12)u/ml,明显高于共转野生型重链和轻链基因细胞((71±11)μg/l和(0.35±0.05)u/ml).结果表明,链间二硫键形成可提高双载体转bdd-fⅷ基因的功效,为进一步动物体内运用双aav载体转bdd-fⅷ基因提供了实验依据. %K b区缺失的凝血viii因子 %K 双载体 %K 转基因 %K 链间二硫键 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110296&flag=1