%0 Journal Article
%T 丙型肝炎病毒f蛋白缺失对病毒复制及感染性的影响
%A 王文博？
%A 许刚？
%A 王岩？
%A 陶清源？
%A 任浩？
%A 戚中田？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2012
%X 探索了f蛋白缺失及核心蛋白(core)二级结构改变对丙型肝炎病毒(hcv)复制和感染性的影响．利用定点突变方法，将j6jfh1的核心基因引进5个终止密码子以中断f蛋白的表达，从而获得f蛋白缺失的病毒复制子j6jfh1/δf．体外制备rna转录体，并电穿孔转染huh7.5.1细胞，采用免疫荧光、实时荧光定量pcr方法以及病毒感染等方法，观察f蛋白缺失对病毒复制、蛋白质表达及转染细胞上清感染性病毒颗粒产生的影响．在此基础上，构建5个单一突变病毒体，对hcv核心蛋白进行二级结构分析，观察核心蛋白二级结构对hcv复制和翻译的影响．结果显示，转染48h后，j6jfh1/δf与野生型j6jfh1相比，j6jfh1/δf转染阳性细胞数明显降低，细胞内hcvrna水平降低约95%，j6jfh1/δf转染后不同时间点细胞上清中hcvrna拷贝数和病毒颗粒也明显降低．5个单一突变体不影响核心基因二级结构，病毒在细胞内复制和感染性与野生型水平一致．j6jfh1/δf所产生的改变可能是由于5处突变导致核心基因二级结构改变而造成的．结果说明，hcvf蛋白缺失不影响病毒的复制翻译及病毒颗粒的包装释放，核心蛋白二级结构的改变对病毒复制和翻译则产生较大影响．
%K 丙型肝炎病毒
%K f蛋白
%K 核心蛋白
%K 二级结构
%K 病毒复制
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110272&flag=1