%0 Journal Article
%T 胎羊3β,20α-羟类甾醇氧化还原酶活性位点的组氨酸残基的鉴定
%A 陈清轩？
%A FREDERICK SWEET？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 1991
%X 为进一步研究胎羊3β,20α-羟类甾醇氧化还原酶活性中心的特性,我们合成了放射性的16α-溴乙酸基孕酮和5α-二氢睾酮-17-溴乙酸酯作为亲和标记试剂。二者都是以不可逆的方式,活性位点定向地竞争性抑制酶的活性。当酶的浓度为1μmol/l,抑制剂的浓度为100μmol/l时,使酶失去一半活性所需时间(t0.5)分别为75min(16α-bap)和480min(5α-dtb)。当在反应混合液中有底物孕酮或5α-二氮睾酮存在时,可降低抑制剂对酶活性的抑制速度。把标记的酶用盐酸水解,用氨基酸分析仪进行分析,最后确定,位于酶的活性中心的被标记氨基酸为组氨酸,它可能在氧化还原反应过程中发挥着重要作用。
%K 3β
%K 20β-羟类甾醇氧化还原酶
%K 亲和标记
%K 16α-[2′-14c]溴乙酸孕酮
%K 5α-二氢睾酮17-[2′-14c]溴乙酸酯
%K 组氨酸
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=19910209&flag=1