%0 Journal Article %T 人心肌肌钙蛋白i-c融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 %A 闫存玲? %A 徐国宾? %A 夏铁安? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2004 %X 提取人心肌组织总rna,rt-pcr扩增出人心肌肌钙蛋白i(cardiactroponini,ctni)和肌钙蛋白c(tnc)基因,利用人工合成的可编码19个中性氨基酸残基为主的dna序列(linker),将ctni和tnc基因连接,插入到质粒pet15b中,将鉴定正确的重组pet15b质粒转化入大肠杆菌bl21(de3)plyss中,用异丙基-β-d–硫代半乳糖苷(iptg)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长ctni-c融合蛋白(ctni-linker-tnc)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达21mg/l.利用目的蛋白n端的组氨酸“标签”(his-tag),经一步ni2+-sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)纯蛋白质.经初步研究,ctni-c具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为ctni测定系统可溯源的候选参考物质,推进ctni检测的标准化进程. %K 心肌肌钙蛋白i-c %K 融合蛋白 %K 表达 %K 纯化 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20040908&flag=1