%0 Journal Article %T es细胞体外定向分化为成熟肝细胞的实验研究 %A 胡安斌? %A 蔡继业? %A 郑启昌? %A 洪岸? %A 何晓青? %A 戴云? %A 单于? %A 潘运龙? %A 李凌松? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2004 %X 探讨了肝细胞在胚胎干细胞(escell)体外诱导分化系统中成熟分化的条件、机制及其鉴定方法.利用tgf,bfgf、hgf等细胞生长因子进行balb/c小鼠es细胞向肝细胞方向的定向诱导.利用反转录聚合酶链反应(rt-pcr)、免疫细胞化学(icc)和放射免疫法(ria)动态检测肝细胞特异性基因和蛋白afp,alb,g6p,tat,ck8,ck18等在培养体系中的表达,并测定肝细胞的尿素合成功能,最后测定肝细胞分化率.结果,肝细胞特异基因afp,alb,g6p和tat最早分别于第3、9、11、13天表达,肝细胞特异蛋白afp,ck8,ck18和alb最早分别于第7、9、9和11天开始表达.第12天开始检测到尿素出现,浓度为8.3μmol/l,并随培养时间延长而浓度逐渐增加.最后,测得生长因子诱导组肝细胞的分化率为32%,对照组肝细胞分化率为8%.说明肝细胞可以在es细胞体外诱导分化系统中出现并成熟分化,bfgf、hgf、osm等可以明显提高细胞分化率和成熟度,有望成为解决肝功能替代疗法中细胞来源问题的新希望. %K 胚胎干细胞 %K 肝细胞 %K 定向分化 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20040607&flag=1