%0 Journal Article %T 铜绿假单胞菌lasr基因反义核酸原核表达载体的构建及对该菌毒力的影响 %A 张玲? %A 周俊立? %A 李静铭? %A 廖芳? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2007 %X pcr扩增lasr基因,用反向克隆法构建lasr基因反义核酸原核表达载体pucp18/lasrantisense并转化铜绿假单胞菌,经酶切、pcr及测序鉴定重组载体.rt-pcr检测lasb基因和lasi基因mrna的表达,nad法测定外毒素a的活性,紫外分光光度计测定绿脓菌素的产生水平.用转化pucp18/lasrantisense质粒菌株感染大鼠呼吸道并进行病理组织切片检查.pcr扩增出约720bp片段,与genbank(no:nc_002516)报道的基因片段大小一致,构建了lasr基因反义核酸原核表达载体pucp18/lasrantisense,并成功转化铜绿假单胞菌,且有效表达,使转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素a和绿脓菌素表达水平均降低.与标准株感染的大鼠比较,转化pucp18/lasrantisense质粒菌株感染的大鼠支气管炎症明显减轻.上述结果表明,lasr基因反义核酸原核表达载体pucp18/lasrantisense可以降低铜绿假单胞菌的毒力. %K lasr基因 %K 反义核酸 %K 细菌转化 %K 毒力因子 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070073&flag=1