%0 Journal Article
%T 利用受体漂白荧光共振能量转移技术研究β-分泌酶在活细胞内的二聚化
%A 陆锦玲？
%A 储军？
%A 杨杰？
%A 曾绍群？
%A 骆清铭？
%A 张智红？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2008
%X β淀粉样肽(aβ)在阿尔茨海默病(ad)患者脑内的产生、聚集和沉积是ad的一个固有病理特征，也被普遍认为是ad的重要发病机理之一．β-分泌酶(bace)对淀粉样前体蛋白(app)的裂解是aβ产生的关键步骤，β-分泌酶抑制剂是ad药物治疗的一个重要发展方向，因此对bace结构的了解具有重要意义．利用受体漂白荧光共振能量转移(fret)技术首次在活细胞内研究bace的二聚化结构．通过基因工程技术分别构建了青色荧光蛋白(cfp)和黄色荧光蛋白(yfp)标记的全长bace(bace-fl)和bace活性部分(bace-nt)，应用共聚焦荧光显微镜和受体漂白fret技术研究了bace-fl和bace-nt在细胞中的表达和定位，以及它们在活细胞内的存在形式．实验结果表明：a．bace-fl在内质网至细胞膜均有表达，主要分布在高尔基体、细胞膜和内体等细胞器中，而bace-nt则被滞留在内质网里．b．bace-nt是单体结构，而bace-fl在活细胞内则以二聚体的形式存在．证明，bace的跨膜序列和c端对bace的转运和定位具有重要作用，其二聚体结构由这些序列决定，而不由其活性位点决定．
%K β-分泌酶
%K 二聚化
%K 阿尔茨海默病
%K 荧光共振能量转移
%K 受体漂白
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070453&flag=1