%0 Journal Article
%T sirna沉默g6pd表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响
%A 朱月春？
%A 吕会茹？
%A 李丹怡？
%A 童淑芬？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2008
%X 研究表明，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(g6pd)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关．为阐明g6pd与肿瘤的关系及其机理，针对人g6pd基因设计3条sirna和一条无关序列，再据每一序列，合成两条互补并含sirna正反义链的dna，退火后与含gfp的载体prnat-u6.2/lenti连接，转染人皮肤黑色素瘤a375细胞，real-timepcr筛选有效的一条sirna，经病毒颗粒包装和病毒生产并感染a375细胞，g418筛选后，挑取单个阳性克隆放大培养，westernblotting检测sirna干扰g6pd效率为88.83%，构建成g6pd缺陷型a375稳转细胞(a375-g6pdδ)．与野生型a375细胞(a375-wt)比较，a375-g6pdδ的g6pd活性仅为21.53%，细胞倍增时间延长，增殖被抑制，克隆形成率降低25%(p<0.05)，凋亡细胞数增加2.86倍(p<0.01)，spf增加33.8%(p<0.05)，pi增加59.7%(p<0.01)，g0/g1期下降27.7%(p<0.01)，凋亡相关蛋白p53下降54.7%(p<0.01)、caspase-3增加2.2倍(p<0.01)和bcl-2降低21.7%(p>0.05)，提示，g6pd缺陷可能通过下调p53蛋白表达和上调caspase-3的表达，抑制g2/m期向g0/g1期转换的进程，促进a375的凋亡，机理有待于进一步探讨．
%K sirna干扰
%K 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
%K 人皮肤黑色素瘤
%K 稳转细胞株
%K 细胞周期
%K p53
%K caspase-3
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070464&flag=1