%0 Journal Article %T 快捷的定点突变效率近100%的大引物pcr方法 %A 谢振华? %A 史小军? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2009 %X 报道了一种新的pcr突变方法,它不需要纯化大引物或设计特别的旁侧引物.利用一个诱变引物和两个测序引物(tm≤58℃)作为旁侧引物.第一轮pcr产物12.5μl直接加入到50μl的第二轮pcr反应体系作为模板和大引物,在开始第二轮pcr反应时,增加在68℃退火温度下进行10个循环的不对称pcr,这一步骤大大提高了通过600bp或800bp大引物所导致的突变效率.结果表明,该方法的产物能够达到高保真、97%~98%的突变效率和高产率. %K 聚合酶链反应 %K 定点突变 %K 大引物 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20090139&flag=1