%0 Journal Article %T dna足纹步移作图法 %A 谭文斌? %A 朱敏? %A 聂怡玲? %A 罗赛群? %A 成光杰? %A 胡维新? %A 彭兴华? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2001 %X 一种以pcr介导的、可对任意长度靶dna片段上的核蛋白结合位点进行dna足纹作图分析的新方法.原理是:采用被随机降解靶dna分子作为模板,用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增.首先,利用某种化学试剂或酶如dnaseⅰ对已与蛋白质结合或未结合的双链靶dna进行随机降解,在一定条件下使每一个dna分子恰好只有一个位点被切割.然后,这些被随机降解dna分子即可作为模板,用同位素标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物(正向或反向)进行单链扩增.最后,扩增的单链产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影形成dna片段梯队,而被蛋白质保护的位点则在dna片段梯队中形成位置缺口,从而确定dna与蛋白质相结合的精确位点.该方法被应用对人干细胞因子基因5′旁侧-1190~-273区域的dna足纹部分作图. %K dna足纹分析 %K 聚合酶链式反应 %K 人干细胞因子基因 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20010426&flag=1