%0 Journal Article %T 大鼠脑cdna文库的构建 %A 宋学文? %A 赵崇? %A 周仁? %A 郭善一? %A 张镜宇? %J 生物化学与生物物理进展 %D 1996 %X 采用简单高效的cdna合成技术制备wistar大鼠脑cdna基因文库,以纯化的poly(a)+-rna为模板,含noti切点的oligo-(dt)15为引物,在反转录酶的作用下,合成第一股单链cdna;用e.colirnaseh除去模板rna,并以e.colidna聚合酶i,e.colidna连接酶和t4dna聚合酶催化合成cdna第二条链,即成为双链cdna;此双股cdna除0.5μg用于插入psporti载体,转入e.colidh5a,建成cdna文库外,其余保存在-20℃,以此cdna为模板,应用pcr方法,先后克隆了谷氨酸脱羧酶(gad,1800bp)、神经元特异性烯醇化酶(nse,1340bp),甲状腺激素受体(t3-receptor,1230bp)、胆囊收缩素(cck,345bp)的全编码基因. %K wistar大鼠脑 %K cdna文库 %K 聚合酶链式反应 %K 分子克隆 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=19960219&flag=1