%0 Journal Article %T 一种新颖简便的荧光实时rt-pcr相对定量方法的建立 %A 张驰宇? %A 徐顺高? %A 黄新祥? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2005 %X 为建立一种新颖、简便的荧光实时rt-pcr相对定量方法,根据实时定量标准曲线,推导出相对定量基因表达的公式.公式显示相对表达指数只与ct值和标准曲线的斜率相关.构建标准曲线的标准品需要通过克隆和体外转录获得,实验过程繁琐.当人为成比例增减标准品各个稀释度的具体拷贝数时,标准曲线的斜率并不改变,说明标准曲线斜率与标准品的具体拷贝数无关.因此,新的相对定量方法可以用任何一个待测样品的总rna(或cdna),经系列稀释后作为标准品,来构建相对定量标准曲线,获得斜率.与绝对定量法比较,新方法获得了基本相同的斜率和非常一致的定量结果(差异小于4%),而传统的2-δδct法却表现出较大的定量误差.这些结果表明,新的相对定量方法是一种简便、准确和高效的定量基因表达的方法. %K 荧光实时定量 %K rt-pcr %K 相对定量 %K 绝对定量 %K 标准曲线 %K mrna %K 定量 %K 斜率 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2005-0257&flag=1