%0 Journal Article
%T 棉花脱水应答元件(dre)结合蛋白ghdbp1的原核表达、纯化及其dna结合活性
%A 黄 波？
%A 刘进元？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2006
%X 棉花是一种重要的经济作物，其生产和产量要受到干旱、低温和高盐等环境胁迫的影响，因此提高棉花对这些胁迫的抗性非常重要.脱水应答元件(dre-dehydrationresponsiveelement)结合蛋白(dbp)在调节植物对环境胁迫的抗性中起到非常重要的作用.而且过量表达dbp类基因的转基因植株能够很好抵抗这些环境胁迫，所以研究棉花中此类dre元件结合蛋白对棉花生产有非常重要的意义.在以前的工作中，从棉花中分离一个dbp基因，命名为ghdbp1并在转录水平上分析它在棉花植株中的表达特征.在研究中，报道了ghdbp1的原核表达、纯化和它的dna结合特性.ghdbp1基因的编码区用pcr技术扩增出来插入到原核表达载体pet28a中，并转化到大肠杆菌菌株bl21(de3)中.经过iptg诱导，ghdbp1融合蛋白在bl21(de3)菌株中成功进行表达.利用ni-nta亲和层析技术得到了纯化的融合蛋白.在非同位素的凝胶滞留实验中，纯化的ghdbp1融合蛋白能够结合到含有dre元件的dna片段上.另外，用swiss-model软件对ghdbp1蛋白的dna结合区的三维结构进行了计算机模拟.模拟的结果显示，ghdbp1蛋白的dna结合区的主链结构和折叠模式与已知的拟南芥gcc盒结合蛋白aterf1的dna结合区结构很相似.这些结果显示了ghdbp1是一个脱水应答元件(dre)结合的转录因子，并可能运用与aterf1的dna结合区相似的结构和它的目标序列脱水应答元件(dre)相结合.
%K 棉花
%K dre结合蛋白
%K 原核表达
%K 纯化
%K 凝胶滞留
%K (emsa)
%K 同源建模
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2005-0745&flag=1