%0 Journal Article %T 鼻咽癌侯选抑瘤基因brd7原核表达载体的构建及其表达(英) %A 聂新民? %A 张必成? %A 向娟娟? %A 朱诗国? %A 周鸣? %A 董利? %A 余鹰? %A 李小玲? %A 李桂源? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2002 %X brd7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因,为了构建brd7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达,设计了带有salⅰ,notⅰ酶切位点的引物,以已构建好的质粒pgem-teasy/brd7为模板,用pcr扩增出brd7基因的完整阅读框架,并用salⅰ,notⅰ酶切pcr产物和原核表达载体pgex-4t-2,然后用t4dna连接酶将其连接,得到重组表达质粒pgex-4t-2/brd7,经双酶切鉴定和测序验证,表达载体构建正确.重组表达质粒转化感受态大肠杆菌jm105后用iptg诱导,成功表达了一分子质量约为90ku的融合蛋白;37℃诱导4h后,sds-聚丙烯酰胺凝胶(page)电泳后,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量28.48%,蛋白质印迹(western-blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功.这为brd7基因的蛋白纯化及抗体制备,进一步开展其功能研究奠定了基础. %K 鼻咽肿瘤 %K 基因表达 %K brd7基因 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20020427&flag=1