%0 Journal Article %T 采用蛋白质工程技术将αb-晶状体蛋白导入心肌细胞的初步研究 %A 蒋磊? %A 刘双? %A 袁灿? %A 肖卫民? %A 王慷慨? %A 尢家(马录)? %A 肖献忠? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2002 %X 为将αb-晶状体蛋白(αb-crystallin,αb-c)导入心肌细胞,采用蛋白质工程技术将人αb-晶状体蛋白全长cdna基因克隆至具有细胞膜通透能力的膜移位序列(membrane-translocatingsequence,mts)的碱基顺序的下游,在大肠杆菌中表达谷胱甘肽5-转移酶(gst)-mts-αb-c融合蛋白.用谷胱甘肽-sepharose4b亲和层析分离表达产物,用xa因子将其中gst切除,并通过阴离子交换层析纯化mts-αb-c.纯化的mts-αb-c在sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)上呈单一条带,分子质量23ku;免疫印迹显示gst-mts-αb-c与mts-αb-c均能为人αb-c抗体识别而在相应位置出现清晰条带.gst-mts-αb-c与mts-αb-c均有分子伴侣活性.用异硫氰荧光素(fitc)标记的mts-αb-c与心肌细胞共培养后,在荧光显微镜下观察到其进入了心肌细胞. %K αb-晶状体蛋白 %K 蛋白质工程 %K 膜移位序列 %K 心肌细胞 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20020224&flag=1