%0 Journal Article %T 伪狂犬病病毒闽a株ge基因去信号肽片段在pichiapastoris中的表达 %A 敖敬群? %A 王瑾雯? %A 陈新华? %A 王珣章? %A 龙綮新? %A 娄高明? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2003 %X 伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白e是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白.将伪狂犬病病毒闽a株ge基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母(pichiapastoris)表达载体ppiczαa中,获得的重组表达载体ppiczαa-fl电击转化野生型酵母菌smd1168后,得到多株酵母工程菌smd1168/ppiczαa-fl.经高浓度zeocintm筛选、表型鉴定、工程菌的诱导表达及表达产物的鉴定,最后得到高效表达ge基因去信号肽片段的酵母工程菌smd1168/ppiczαa-fl-7.工程菌72h培养上清的sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质印迹结果显示,ge基因去信号肽片段表达产物大小约为80ku,比预期的63.8ku大.凝胶薄层扫描结合bradford蛋白质总含量测定结果表明,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的13.49%,表达量可达11.7mg/l.间接elisa结果表明重组表达产物具有良好的抗原性,能够有效地区分伪狂犬病病毒ge标准阳性与阴性血清. %K 伪狂犬病病毒 %K ge基因去信号肽片段 %K pichia %K pastoris表达系统 %K 抗原性 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20030424&flag=1