%0 Journal Article
%T 大肠杆菌碱性磷酸酶的体外定向进化研究
%A 徐卉芳？
%A 张先恩？
%A 张治平？
%A 张用梅？
%A A.E.G.CASS？
%J 生物化学与生物物理进展
%D 2003
%X 大肠杆菌碱性磷酸酶（e.colialkalinephosphatase,eap,ec3.1.3.1）是一个非特异性二聚体磷酸单酯酶.采用易错聚合酶链反应(errorpronepcr)的方法，在原有高活力突变株的基础上，对eap远离活性中心催化三联体的区域进行定向进化，经两轮errorpronepcr，获得催化活力较亲本d101s突变株提高3倍、较野生型酶提高35倍的进化酶4-186，并对该酶的催化动力学特征进行了分析.进化酶基因的dna测序表明4-186含两个有义氨基酸置换：k167r和s374c，二者既不位于底物结合位点，也不位于酶的金属离子结合位点.
%K 定向进化
%K 易错聚合酶链反应
%K 大肠杆菌碱性磷酸酶
%K 催化活力
%U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20030117&flag=1