%0 Journal Article %T 人sdct2蛋白亚细胞定位信号分析 %A 白雪源? %A 侯剀? %A 陈香美? %A 冯哲? %A 傅博? %A 吴镝? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2004 %X 为了确定人高亲和力钠离子依赖性二羧酸共转运蛋白(high-affinitysodium-dependentdicarboxylateco-transporter,sdct2,nadc3)在细胞内的定位,构建了sdct2与增强型绿色荧光蛋白(egfp)的融合蛋白表达载体,并转染肾小管上皮细胞llc-pk1,激光共聚焦显微镜观察显示,sdct2蛋白主要定位于细胞的基底侧膜上.同时将sdct2-egfp融合基因mrna显微注射到爪蟾卵母细胞中表达,可见融合蛋白的绿色荧光仅分布在细胞膜上.为了进一步确定该蛋白质的亚细胞定位信号序列,将sdct2基因的n端及c端分别缺失,并构建缺失突变体与egfp的融合蛋白表达载体,将它们转染到llc-pk1中,观察sdct2缺失体在细胞内的分布情况.结果显示,n端缺失的sdct2蛋白主要位于细胞质中,顶膜和基底侧膜上也有表达;c端缺失的sdct2蛋白主要位于基底侧膜上,顶膜几乎没有表达,细胞质中表达很少.免疫组化结果也显示,sdct2只表达于人近端肾小管上皮细胞的基底侧膜.这表明sdct2蛋白的n端序列对其亚细胞定位是必需的,人sdct2蛋白的基底膜定位信号位于n端序列中. %K 二羧酸共转运蛋白 %K 亚细胞定位 %K 增强型绿色荧光蛋白 %K 肾小管 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20041005&flag=1