%0 Journal Article
%T 锦鲤疱疹病毒gz1301株的分离与鉴定
%A 李莹莹？
%A 王庆？
%A 曾伟伟？
%A 潘厚军？
%A 王英英？
%A 刘春？
%A 梁红茹？
%A 石存斌？
%A 吴淑勤？
%J 水产学报
%P 1159-1166
%D 2014
%R 10.3724/SP.J.1231.2014.49159
%X 2013年4月，广东省一锦鲤养殖场暴发不明病因疾病，濒死锦鲤在塘边游动缓慢直至死亡，死亡率高达100%。现场采样发现，发病锦鲤体长25cm，眼球凹陷，胸鳍及腹鳍出现出血斑点，解剖发现内脏器官包括肝、脾、肾肿大。细菌分离结果显示，内脏器官肝脏和肾脏中未分离到细菌。提取自然发病鱼的肝、脾、肾、鳃组织dna作为模板，采用世界动物卫生组织（oie）推荐的锦鲤疱疹病毒（khv）检测引物进行pcr扩增，均能扩增出预期大小的特异性产物。ncbi的blast搜索结果显示，扩增序列与khv胸苷激酶（thymidinekinase，tk）基因核苷酸序列同源性为99%。病鱼内脏组织研磨过滤除菌后，腹腔注射20尾锦鲤，可复制出与自然发病相似的症状，并于7d内全部死亡。取病鱼的鳃和肾脏研磨过滤除菌后进行细胞感染实验，结果显示，组织滤液感染ccb细胞后，盲传5代可以观察到典型的细胞病变效应（cpe）。将出现典型cpe的ccb细胞进行超薄切片制备和电镜观察，电镜下病毒呈对称20面体，直径约100nm。将出现典型cpe的细胞进行间接免疫荧光实验，可以观察到特异性荧光。根据tk基因全长序列建立系统进化树，证实该毒株为khv亚洲型毒株，暂命名为khv-gz1301株。研究结果可为khv起源进化、分类以及疾病防控提供重要材料。
%K 锦鲤
%K 锦鲤疱疹病毒
%K tk基因
%K 病毒鉴定
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140309159&flag=1