%0 Journal Article
%T 草鱼呼肠孤病毒taqmanreal-timepcr检测方法的建立
%A 周勇？
%A 曾令兵？
%A 范玉顶？
%A 徐进？
%A 马杰？
%A 罗晓松？
%A 肖艺？
%J 水产学报
%P 774-779
%D 2011
%R 10.3724/SP.J.1231
%X 利用rt-pcr技术扩增出草鱼呼肠孤病毒(gcrv)vp6蛋白编码区长度为1250bp的片段,克隆到pegfp-n1载体上,构建重组质粒pegfp-n1-vp6。经pcr鉴定确认正确后,以10倍梯度稀释pegfp-n1-vp6重组质粒,作为标准模板进行taqmanreal-timepcr扩增,制作标准曲线,建立了草鱼呼肠孤病毒的荧光定量pcr检测方法。检测结果显示,标准曲线的相关系数(r2)达到0.99809,斜率为-3.373;对初始模板定量检测的范围为1×101～1×106copies/μl;特异性试验结果表明,该方法可特异性地检测出草鱼呼肠孤病毒,而对鲤春病毒血症病毒(svcv)、传染性造血器官坏死症病毒(ihnv)无检测信号。本研究建立的草鱼呼肠孤病毒taqmanreal-timepcr方法灵敏度高、特异性强,可进行定量分析,对草鱼出血病快速诊断与病毒病原定量检测有重要意义。
%K 草鱼呼肠孤病毒
%K vp6蛋白编码基因
%K taq
%K man
%K real-time
%K pcr
%K 检测
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110107358&flag=1