%0 Journal Article
%T 缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的特性及在氮饥饿过程中相对转录量的分析
%A 李春阳？
%A 杜道海？
%A 于水燕？
%A 李惠？
%A 刘凡？
%A 周志刚？
%J 水产学报
%P 1343-1353
%D 2010
%R 10.3724/SP.J.1231.2010.06985
%X 根据莱茵衣藻和普通小球藻ω3脂肪酸去饱和酶氨基酸序列(genbank登录号分别为abl09485和bab78717)的保守区(tmfwalf和hhdigth)设计简并引物,以缺刻缘绿藻h4301总rna为模板,通过反转录pcr和cdna末端快速克隆技术(race),克隆了缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的cdna全长序列(genbank登录号:eu658930),它与莱茵衣藻的这个基因具有69%相似性。该基因cdna序列长2330bp,其中5′-非翻译区长107bp;3′-非翻译区912bp,且具有明显的poly(a)尾巴;开放阅读框1311bp,编码一个436个氨基酸的蛋白质,分子量为49.06ku,等电点7.85;该基因编码的蛋白为膜结合蛋白,含有2个疏水区域和3个保守的组氨酸簇基序。将该基因的cdna序列与其dna序列比对后,发现该基因在其编码区存在6个内含子,剪切位点均符合“gtag”规则。实时荧光定量pcr结果显示,在氮饥饿培养过程中,缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的相对转录量在4h时可能因休克显著提高(p<0.05),然后开始下调,12h开始显著下降(p<0.05),并在20h降到最低(约为完全培养基的11.6%),此后保持在低水平(为完全培养基的23.2%)波动(p<0.01)。脂肪酸组分的气相色谱结果表明,在氮饥饿培养过程中,花生四烯酸占总脂肪酸的百分含量逐步提高,而作为多不饱和脂肪酸ω3合成途径的产物,如α-亚麻酸和十六碳三烯酸(16∶3ω3)的百分含量在40h或96h后都显著降低(p<0.05)。这些结果表明缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因在氮饥饿过程中的相对低转录量,导致ω3合成途径相关产物百分含量的降低,确保了该藻沿着ω6途径来合成与积累花生四烯酸以提高其百分含量。另外,十六碳二烯酸(16∶2ω6)、亚油酸及花生四烯酸都可能是该克隆基因所编码ω3脂肪酸去饱和酶的反应底物。
%K 缺刻缘绿藻
%K ω3脂肪酸去饱和酶基因
%K 氮饥饿
%K 实时荧光定量pcr
%K 脂肪酸
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100606985&flag=1