%0 Journal Article %T 中华鳖虹彩病毒单克隆抗体的制备及其抗原表位的初步分析 %A 朱春华? %A 刘荭? %A 刘晓东? %A 杨金先? %A 郑在予? %A 林天龙? %J 水产学报 %P 840-846 %D 2009 %R 10.3724/SP.J.00001 %X 以纯化的中华鳖虹彩病毒为抗原免疫balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞经杂交融合获得了8个能稳定分泌抗中华鳖虹彩病毒特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体亚级份分析结果表明,mab2a4属iga,mab8e1是igg2a,其他的6株单抗mab1d3、mab2h1、mab3a1、mab4b5、mab5e1和mab6f2均为igg1。酶联免疫吸附剂测定(elisa)分析表明,8株单抗均能特异性地识别中华鳖虹彩病毒,与epc、co、fhm等宿主细胞不产生交叉反应,腹水抗体的elisa效价在105~106。ifa分析表明,8株单抗中仅mab5e1没有免疫荧光反应特性,其余7株单抗均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色。中和试验结果证实8株单抗均没有中和病毒的特性。应用western-blotting进行中华鳖虹彩病毒的抗原表位初步分析,结果显示:mab1d3和mab2a4分别识别分子量为84ku和35ku中华鳖虹彩病毒结构蛋白,mab3a1能够同时识别分子量分别为14ku和16ku的两条多肽,说明这3株单抗结合位点是非构象依赖性抗原决定簇,其余单抗不具备western-blotting反应特性。这些结果提示上述单抗对中华鳖虹彩病毒抗原特异、灵敏,可用于中华鳖虹彩病毒的检测和结构蛋白分析。 %K 中华鳖 %K 虹彩病毒 %K 单克隆抗体 %K 抗原 %U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20081106210&flag=1