%0 Journal Article %T 海带cbbx基因序列特征及在雌、雄配子体之间的差异表达 %A 石微微? %A 王丽丽? %A 陈晶? %A 欧阳珑玲? %A 周志刚? %J 水产学报 %P 80-88 %D 2010 %R 10.3724/SP.J.1231.2010.06456 %X 根据海带雄配子体抑制消减cdna文库中筛选出的克隆18序列设计基因特异性引物,利用cdna末端快速扩增技术(rapidamplificationofcdnaends,race),克隆了一条长2087bp的cdna序列(genbank登陆号:ef490312),其中开放阅读框1275bp,5′-非翻译区(untranslatedregion,utr)长118bp,3′-utr长694bp且具有明显的polya尾巴。蛋白同源搜索显示,它编码的蛋白与guillardiatheta这种隐藻核型体编码的cbbx蛋白(genbank登录号:cab65663)具有66%同源性。推测的海带配子体cbbx基因编码一个含有424个氨基酸的前体蛋白,前19个氨基酸为信号肽序列。酶切后的成熟蛋白由405个氨基酸组成,分子量为45.26ku,等电点为5.28。海带配子体cbbx基因被8个内含子隔离开,它们的剪切位点都遵循“gt-ag”规则。无论在cdna或者dna序列上,雌、雄配子体cbbx基因都没有差异。自编码蛋白的第184位gly开始,具有一个典型的walkeratp结合motif。通过与其它物种共14个cbbx蛋白序列构建的neighbor-joining系统演化树可知,它与隐藻核型体及红藻核基因组编码的蛋白聚成一类,而区别于叶绿体编码蛋白。因此,推测该克隆的海带配子体,cbbx基因可能是由核基因组编码的。荧光定量pcr(q-rt-pcr)结果证实,cbbx基因在海带雄配子体的表达量明显高于雌配子体的,且在雌、雄配子体之间存在不同的日转录图谱。实验为海带配子体cbbx这个差异表达基因的功能研究和亚细胞定位奠定了基础。 %K 海带 %K 配子体 %K cbbx基因 %K 核甘酸序列 %K 转录 %U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20090506456&flag=1