%0 Journal Article
%T 尼罗罗非鱼微阵列fosmid基因组文库的构建及基因筛选
%A 李明辉？
%A 吴风瑞？
%A 熊传奇？
%A 曾圣？
%A 杨世杰？
%A 叶凯？
%A 蒋汶洮？
%A 孙运侣？
%A 黄宝锋？
%A 魏莹莹？
%A 焦静？
%A 顾源？
%A 王德寿？
%J 水产学报
%P 27-34
%D 2011
%R 10.3724/SP.J.1231.2011.17136
%X 以pcc2fos为载体构建尼罗罗非鱼fosmid基因组文库,共挑选115200个单菌落,保存在300块384孔样品板中,构建4800个行池、7200个列池、300个板池和25个超级池,形成微阵列,并对其进行复制备份。该文库插入片段平均长度约为40kb,覆盖约罗非鱼基因组的3倍。连续传代实验研究表明,文库具有良好的稳定性。由于构建超级池－板池－行、列池三级池系统形成的微阵列,有助于快速、准确、有效地筛选目的基因,仅需77个pcr反应(超级池25板池12行池16列池24)就能筛选到含有目的基因的一个单克隆,解决了普遍存在的文库筛选难题。通过文库尝试筛选18个与性别分化和生长相关基因,均获得2~5个阳性克隆,说明文库具有较好的实用性。
%K 尼罗罗非鱼
%K 基因组文库
%K 微阵列
%K 基因筛选
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100907136&flag=1