%0 Journal Article %T 白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立 %A 何琳? %A 徐海圣? %A 王美珍? %A 戎华南? %J 水产学报 %P 598-603 %D 2010 %R 10.3724/SP.J.1231.2010.06741 %X 根据对虾白斑综合征病毒(wssv)囊膜蛋白vp28基因保守序列,利用primerexplorerv4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的lamp检测方法与巢式pcr进行了比较分析。结果表明,lamp最适反应在64℃恒温条件60min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加sybrgreeni荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果。lamp方法的最低检出限为100拷贝/μl,灵敏度较巢式pcr高100倍,而且lamp方法在1h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果。用建立的lamp方法对临床发病南美白对虾样品进行了检测,结果表明,lamp方法适合对虾白斑综合征病毒的现场快速检测。 %K 对虾 %K 白斑综合征病毒 %K 环介导等温扩增 %K 快速检测 %U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20091206741&flag=1