%0 Journal Article
%T 急性病毒性坏死病毒dutpase基因的克隆、表达及其产物的酶学活性分析
%A 贾志磊？
%A 王崇明？
%A 任伟成？
%A 梁彦韬？
%A 曲朋？
%A 李赟？
%J 水产学报
%P 1320-1326
%D 2011
%R 10.3724/SP.J.1231
%X 根据已测定完成的栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acuteviralnecrosisvirus,avnv)基因组序列,设计特异性引物,以提取的发病扇贝组织总dna为模板,pcr扩增得到编码avnvdutpase的开放阅读框orf074,将产物克隆至原核表达载体pet32a(+)中,构建表达质粒pet32a-dut。然后,将其转化至e.colibl21(de3)进行诱导表达。sds-page检测显示,诱导表达蛋白分子量约为46ku,与预期表达蛋白大小一致。经western-blotting及质谱分析鉴定,所表达蛋白即为重组dutpase。表达产物经co2+柱纯化后进行酶学活性测定。结果显示,重组dutpase能特异性催化dutp,edta可以抑制dutpase的活性,而mg2+可以增强其活性。
%K 栉孔扇贝
%K dutp焦磷酸酶
%K 急性病毒性坏死病毒
%K 原核表达
%K 酶学活性
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110407463&flag=1