%0 Journal Article
%T 草鱼呼肠孤病毒hz08株vp4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
%A 曾伟伟？
%A 王 庆？
%A 王英英？
%A 石存斌？
%A 吴淑勤？
%J 水产学报
%P 450-456
%D 2013
%R DOI:10.3724/SP.J.1231.2013.38410
%X 为了建立针对草鱼呼肠孤病毒（gcrv）流行株的血清学检测方法，本研究构建了能高效表达gcrvhz08株主要衣壳蛋白vp4的重组表达载体pet32a-s6，利用纯化的vp4重组蛋白免疫balb/c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与sp2/0细胞融合，经过克隆和筛选，获得3株能稳定分泌抗vp4重组蛋白单克隆抗体（monoclonalantibody，mcab）的杂交瘤细胞，分别命名为2c2、2f3和5e5。抗体经亚型鉴定均为igg1，轻链为kappa链；间接elisa试验证明，三株杂交瘤细胞分泌的mcab可特异性识别gcrv-hz08，与gsrv,isknv,ihnv均无交叉反应。选择2c2作为腹水生产细胞株，免疫小鼠后腹水elisa效价为1:720000；ifa和westernblot结果显示，这株杂交瘤细胞分泌的mcab能够特异性识别gcrv-hz08病毒粒子。本研究制备的mcab具有良好的生物学特性，为gcrv流行株检测方法的建立及vp4蛋白相关功能研究奠定了基础。
%K 草鱼呼肠孤病毒
%K vp4蛋白
%K 单克隆抗体
%U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20121108410&flag=1