%0 Journal Article %T 半滑舌鳎生长因子midkine的定点改造及原核表达 %A 王亚楠? %A 刘旭东? %A 穆琳琳? %A 刘志鹏? %A 李春梅? %A 于海洋? %A 张全启? %J 水产学报 %P 330-336 %D 2013 %R DOI:10.3724/SP.J.1231.2013.37969 %X 为进一步的研究半滑舌鳎(cynoglossusemilaevis)mk成熟肽活性与功能,对半滑舌鳎生长因子midkine成熟肽进行定点改造及原核表达。根据大肠杆菌偏爱密码子的特点,实验利用soeingpcr法对半滑舌鳎mk成熟肽进行定点突变。将改造后的半滑舌鳎成熟肽mk克隆到载体质粒pet32a(),构建原核表达载体pet32a()-mk,并转化大肠杆菌bl21(de3)plyss菌株中。sds-page结果显示,与对照组相比,经iptg诱导表达后半滑舌鳎重组蛋白mk存在于大肠杆菌上清中,产物相对分子质量约为33kd。研究表明,本实验对半滑舌鳎生长因子midkine成功进行了定点改造,原核表达质粒成功构建并在大肠杆菌中高效表达,且主要以可溶形式存在。 %K 半滑舌鳎 %K midkine %K 原核表达 %K 融合蛋白 %U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120207969&flag=1