%0 Journal Article %T 编码缺刻缘绿藻乙酰辅酶a羧化酶bccp亚基的基因克隆与表达分析 %A 李燕? %A 周志刚? %J 水产学报 %P 794-802 %D 2014 %R 10.3724/SP.J.1231.2014.49124 %X 为了探讨在氮饥饿对缺刻缘绿藻花生四烯酸(ara)合成与积累的影响,通过cdna末端快速扩增(race)和设计简并引物进行反转录(rt)-pcr扩增,克隆了编码该藻异质型乙酰辅酶a羧化酶(accase)的2个生物素羧基载体蛋白(bccp)的基因序列。其中mibccp1基因的cdna序列长1267bp,包含的5’-非翻译区(utr)长44bp,3’-utr长524bp,开放阅读框(orf)长699bp,编码232个氨基酸并含有45个氨基酸序列的叶绿体定位信号肽;预测成熟蛋白分子量约为20ku。mibccp2基因的orf长789bp,编码263个氨基酸并含有49个氨基酸的叶绿体定位信号肽,推测成熟蛋白分子量约为22ku,但其羧基端缺乏生物素酰基化位点。邻接法(nj)构建的聚类图显示它们分属于2个不同的分支(靴带值为100)。采用半定量反转录(rt)-pcr技术分析这2个基因的表达量,结果显示,在氮饥饿光照培养条件下,它们的相对转录量都先短暂升高然后持续下调,从而表明缺刻缘绿藻脂肪酸的从头合成能力有下降的趋势。结合该藻的ara含量在该培养条件下明显增加的结果,推测胞质中同质型accase对缺刻缘绿藻ara合成与积累起着更重要的作用。 %K 缺刻缘绿藻 %K 乙酰辅酶a羧化酶 %K 生物素羧基载体蛋白(bccp) %K 氮饥饿 %K 半定量反转录pcr %U http://www.scxuebao.cn/scxuebao/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140209124&flag=1