%0 Journal Article %T 利玛原甲藻中聚酮合酶基因克隆与分析 %A 汤敬谦? %A 李挺? %A 杨维东*? %A 刘洁生? %A 李宏业? %J 生态学报 %D 2009 %X 为探讨聚酮合酶(polyketidesynthase,pks)基因与藻毒素合成的关系,揭示pks基因在赤潮毒素合成中的作用,采用兼并引物,通过pcr技术获得利玛原甲藻(prorocentrumlima)可能存在的i型pks基因;并对所获得pks基因的同源性进行了分析,构建了基于pks氨基酸序列的系统进化树;采用rt-pcr技术分析了pks基因在利玛原甲藻中的表达状况;并通过多聚腺苷酸rna的扩增、细菌的分离鉴定、限制性内切酶酶切、southernblotting等技术对pks基因进行了分析。结果表明,利玛原甲藻中pks基因与海洋原甲藻聚为一支,在利玛原甲藻中有显著表达;以oligo(t)引物进行rt-pcr扩增时,可出现18srrna和pks基因相应条带;限制性内切酶酶切和southernblotting结果显示,该基因中存在明显的甲基化;16srrna基因序列分析显示,从利玛原甲藻培养液中分离到的细菌与海洋放线菌假诺卡氏菌属(pseudonocardia)基因序列同源性达到99%,该菌株中并不存在pks基因。结果显示,所获得的pks基因是利玛原甲藻聚酮合酶基因,基因序列已提交genbank(ef521601);pks可能在腹泻性贝毒合成中起着关键作用。 %K 利玛原甲藻 %K 聚酮合酶 %K 基因克隆 %K 分子杂交 %U http://www.ecologica.cn/stxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20090524&flag=1