%0 Journal Article
%T 豌豆过氧化氢酶在烟草叶绿体中的过量表达提高了植物的抗逆性
%A 王凤德？
%A 衣艳君？
%A 王海庆？
%A 王学臣？
%A 刘家尧？
%J 生态学报
%D 2011
%X 通过构建融合番茄rubp羧化酶小亚基转运肽基因(rbcs-3)和cat基因编码阅读框(orf)的双元表达载体,采用农杆菌介导的叶圆盘转化法将融合基因转入烟草,使其能够定向导入叶绿体中发挥作用。在含有50mg/l潮霉素的培养基上筛选获得转cat烟草30多个株系,并对其进行了分子生物学的验证和生理指标的检测。对获得的抗性植株用pcr、rt-pcr、植株总蛋白westernblot和叶绿体蛋白westernblot分析表明,目的基因已经整合到烟草基因组中,并能正常表达,且在叶绿体rbcs-3转运肽的作用下能定向进入叶绿体中。对转基因植株生理指标的检测发现,在20%peg6000模拟干旱条件下,野生型烟草的相对电导率提高幅度为43.4%,而转cat植株的相对电导率仅提高8.8%,表明在干旱胁迫下转cat烟草的质膜透性小于野生型烟草;经20%peg6000处理后,野生型和转cat基因烟草的叶绿素含量都下降,下降幅度分别为68.0%和20.4%;另外,经20%peg6000处理的野生型烟草叶片的fv/fm下降幅度为5.3%,而转cat基因烟草叶片的fv/fm下降幅度0.9%,这些结果表明,在叶绿体中过量表达cat对干旱胁迫下的细胞质膜、叶绿素和psⅱ具有一定的保护作用。此外,经150μmol/l百草枯处理后发现,处理3h后,野生型烟草和转cat烟草的相对电导率分别比对照提高67.9%和13.5%,而野生型和转cat烟草的fv/fm都下降,降幅分别为23.7%和3.9%,这表明在百草枯氧化胁迫下转cat烟草的质膜和psⅱ的损伤程度都小于野生型烟草。总之,豌豆cat基因在烟草叶绿体中过量表达,提高了转基因烟草的抗旱性和抗氧化性。
%K 烟草
%K 豌豆过氧化氢酶基因
%K 抗逆性
%U http://www.ecologica.cn/stxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=stxb200911181527&flag=1