%0 Journal Article
%T 单核细胞增多性李斯特菌iap 基因的克隆、表达与p60 蛋白的纯化
%A 吕添
%A 曹正茂
%A 武海涛
%A 王小红
%J 食品科学
%D 2010
%X 以单增李斯特菌基因组DNA 为模板，利用自行设计的引物，通过PCR 法扩增出单增李斯特菌的iap 基因。在iap 基因的5 ＇端和3 ＇端分别引入EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ 2 个酶切位点将其克隆到pMD-18T 载体上，构建克隆载体pMD-18T-iap。经测序正确后，将iap 基因克隆至表达载体pET-28a 上构建表达质粒pET-28a-iap。在IPTG 诱导下，携带pET-28a-iap 的E.coli BL21(DE3)高效表达分子质量约为60kD 的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白，其中可溶性蛋白占总p60 蛋白含量的76.3% 左右。诱导表达的可溶性蛋白通过Ni2+ 亲和层析柱纯化得到纯度在95.6% 以上的重组p60 蛋白，其提取率为68.3% 左右
%K 单核细胞增多性李斯特菌
%K iap基因
%K 克隆表达
%K p60蛋白
%K 纯化
%U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract9633.shtml