%0 Journal Article %T 黑曲霉酸性α-淀粉酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 %A 曾庆梅 %A 魏春燕 %A 靳靖 %A 吴聪 %A 黄博英 %J 食品科学 %D 2011 %X ?以黑曲霉aspergillusniger基因组dna为模板,pcr扩增出酸性α-淀粉酶的结构基因,将此基因插入载体ppic9k,重组质粒ppic9k-asaa转化毕赤酵母smd1168,并通过g418平板培养基筛选高拷贝转化子。在酵母α-factor及aox1基因启动子和终止信号的调控下,酸性α-淀粉酶大量表达并分泌到胞外,该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导,摇瓶培养中,2%甲醇诱导培养168h后酶活力达到最大值2838u/ml。sds-page结果显示该重组酶的分子质量为58kd。该酶的最适反应ph值为4.0,在ph3.0~6.0之间酶活力基本保持稳定,最适反应温度为70℃,在工业生产常用温度50℃条件下,该酶能够长时间保持稳定,并具有较高的酶活力。重组毕赤酵母遗传稳定性良好。 %K 黑曲霉 %K 酸性α-淀粉酶 %K ppic9k %K 毕赤酵母smd1168 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract12392.shtml