%0 Journal Article %T thermococcussiculihj21α-淀粉酶186asp定点突变对酶活性的影响 %A 吕明生 %A 杨帆 %A 胡建恩 %A 房耀维 %A 焦豫良 %A 王淑军 %A 刘姝 %J 食品科学 %D 2012 %X ?为确定超嗜热古菌thermococcussiculihj21α-淀粉酶(tsa)中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系,以含tsa基因的pet-28a-his6质粒为模板,利用定点突变技术,将第186位点的天冬氨酸(asp)突变为天冬酰胺(asn),突变子转化至e.colibl21(de3)并经iptg诱导表达,测定突变前后的酶活性,定点突变后的tsa无酶活性;采用dnastar和deepview蛋白分析软件,预测突变前后tsa蛋白的二级结构和三级结构,结果表明thermococcussiculihj21α-淀粉酶的186位点对维持tsa的酶活性具有重要意义,它的突变导致酶蛋白二级结构组件及氢键网络的改变。 %K α-淀粉酶 %K 定点突变 %K tsa基因 %K 186位点 %K 酶活性 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract29255.shtml