%0 Journal Article
%T 脂肪酶的基因克隆、序列分析、高效表达及其催化特性
%A 张卫国
%A 王小宁
%A 林影
%J 食品科学
%D 2011
%X ？分别以r.miehei3.4960基因组和总rna为模板，通过pcr和rt-pcr扩增得到脂肪酶全长基因和脂肪酶cdna碱基序列，两碱基序列测序结果比对表明：脂肪酶dna碱基序列由5个内含子和6个外显子组成，5个内含子大小分别为75、58、64、73、59bp，位于dna序列(以起始密码子atg的碱基a为1)的600～674位、929～986位、1076～1139位、1227～1299位、1382～1440位碱基处。脂肪酶rmlmrna碱基序列与已公布的r.miehei脂肪酶基因mrna(emblnucleotidesequencedatabaseaccessionno.a02536)碱基序列有5个碱基的差异，其编码的氨基酸序列有1个发生了改变。利用酿酒酵母表达质粒picas1，实现了脂肪酶rml基因在酿酒酵母中的高效分泌表达，并对重组脂肪酶rml进行了相关酶学性质分析。酶学性质研究表明：重组酶的最适反应温度为45℃，最适ph值为8.6；该酶偏爱中链长的酯(c8～c12)，对12个碳的酯具有最佳活性，对c16长链酯也有较高的活性，对短链酯的活性较弱；金属离子cu2+、fe2+对酶活性有显著抑制作用，ca2+和mg2+对酶活有部激活作用。
%K 脂肪酶
%K 基因克隆
%K 高效表达
%U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract12064.shtml