%0 Journal Article
%T 天冬氨酸激酶突变体G277K中AK基因的克隆表达及酶学性质表征
%A 任军
%A 方丽
%A 朱运明
%A 李慧颖
%A 詹冬玲
%A 闵伟红
%J 食品科学
%D 2014
%X 通过序列比对和晶体结构分析发现，天冬氨酸激酶（aspartokinase，AK）的G277位点高度保守，并与抑制剂Thr通过氢键相连，对其进行定点突变和酶学性质表征。结果表明：突变体G277K的AK最适反应条件是30 ℃、pH 8.5；动力学实验结果显示突变体AK的正协同效应降低，趋向于米氏酶，参数S0.5、nH、酶比活力、Vmax分别是7.05 mmol/L，1.24、964.3 U/mg、32.143 U/（mg·min）；热稳定性实验显示，其30 ℃半衰期为2.3 h，3 h后酶活力丧失80%左右；Ni2+在低浓度时表现出显著的激活效应；有机溶剂丙三醇、异丙醇和二甲基亚砜的体积分数为1%时，对AK的酶活力有很好的激活作用，表明突变体AK对一些有机溶剂有一定的抗性；低浓度的赖氨酸和蛋氨酸对AK有激活作用
%K 天冬氨酸激酶
%K 克隆表达
%K 定点突变
%K 酶学性质
%U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract33720.shtml