%0 Journal Article %T 野生金荞麦高黄酮含量愈伤组织中一个类异黄酮还原酶(irl)基因的克隆与分析(英文) %A 祝钦泷 %A 郭铁英 %A 眭顺照 %A 刘光德 %A 雷兴华 %A 罗莉莉 %A 李名扬* %J 药学学报 %P 809-819 %D 2009 %X 木脂素是重要的植物防御物质之一,具有优良的生物学活性。为研究传统抗肿瘤良药野生金荞麦的药用次生代谢,用race与文库结合的方法,从野生金荞麦高黄酮含量愈伤系cdna文库中快速克隆了一个类异黄酮还原酶(isoflavonereductase-like,irl)基因fcirl的全长cdna(accessionno.eu116032)。fcirlcdna全长1217bp,含有1个942bp的开放阅读框(openreadingframe,orf),编码313个氨基酸,其5′utr区含有2个终止子tag,3′utr区含有推测的加尾信号ataaa和polya尾,对应基因组序列不含内含子。fcirl蛋白n端含有1个n-乙酰化作用位点(m1-k5)和1个保守的nadph结合位点(g10-g-t-g13-y-i-g16),具有1个保守的nmra结构域(v6-n244)和多个重要的磷酸化位点,以及1个保守的n-糖基化作用位点(n214)。序列同源性比较、系统发生分析以及蛋白质高级结构预测分析均表明,fcirl属于松脂醇-落叶松脂醇还原酶(pinoresinol-lariciresinolreductase,plr)类,推测具有plr的生物活性,是8?8′连接木脂素(8?8′-linkedlignans)合成途径中的关键酶,催化松脂醇和落叶松脂醇,还原生成开环异落叶松脂(secoisolariciresinol),参与金荞麦药用次生代谢与植物的防御。 %U http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract14715.shtml