%0 Journal Article
%T 百日咳杆菌效应cpg-odns调控变应性哮喘toll信号分子的实验研究
%A 张宝袁
%A 迟深
%A 孙云*
%J 药学学报
%P 285-292
%D 2011
%X 从百日咳杆菌中分离出非甲基化寡核苷酸单链(cpg-odns),建立卵白蛋白(ova)致敏的小鼠急性哮喘与慢性哮喘模型,经急性哮喘模型从百日咳杆菌cpg-odns与9条相似度高且含有cg片段的seqa～seqi序列中筛选出有效序列(seqa),以seqa腹腔注射(ip)及灌胃(ig)对急、慢性哮喘小鼠分别进行干预。检测支气管肺泡灌洗液(balf)中白细胞(wbc)总数和嗜酸性粒细胞(eos)数,酶联免疫吸附法(elisa)检测balf中细胞因子及血管内皮生长因子(vegf)水平。逆转录聚合酶链式反应(rt-pcr)检测小鼠脾细胞tlr-9mrna表达量;蛋白印迹(westernblotting)法检测小鼠肺组织tlr-9蛋白表达。结果表明,小鼠急性哮喘模型经腹腔注射及灌胃seqa预处理,可明显抑制balf中wbc总数增加,显著抑制eos增加;百日咳杆菌、cpg+及seqa～seqd灌胃组亦显著抑制eos增加,而seqe～seqi作用不明显;上述各序列干预组以腹腔注射途径抑制eos作用较为显著。对小鼠慢性哮喘模型,cpg+和seqa腹腔注射预处理均能明显上调balf中γ干扰素(ifn-γ)①空白对照组:(176.45±23.46)pg?ml？1;②模型组:(174.11±22.71)pg?ml？1;③cpg+(ip):(220.56±15.42)pg?ml？1;④seqa(ip):(225.23±21.60)pg?ml？1;并下调白介素-4(il-4)①空白对照组:(66.91±5.81)pg?ml？1;②模型组:(81.02±11.24)pg?ml？1;③cpg+(ip):(63.99±6.09)pg?ml？1;④seqa(ip):(62.75±10.03)pg?ml？1;各序列组对vegf无显著影响(p>0.05);seqa腹腔注射亦能上调小鼠脾细胞tlr-9mrna(tlr-9/gapdh)①空白对照组:0.62±0.13;②模型组:0.66±0.17;③cpg+(ip):1.46±0.26;④seqa(ip):1.42±0.34及肺组织tlr-9蛋白表达(tlr-9/β-actin)①空白对照组:0.63±0.16;②模型组:0.61±0.07;③cpg+(ip):1.15±0.25;④seqa(ip):1.03±0.29;但经灌胃途径无明显影响。结果显示,cpg-odns和获得的cpg序列seqa可显著抑制哮喘模型的气道炎症反应以及相应炎症细胞因子水平的改变,其作用机制可能与调节th1/th2平衡、调控toll样受体9(tlr-9)表达有关。
%U http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract13913.shtml